Sensível detecção simultânea de treze agentes associados à vaginose bacteriana por reação em cadeia da polimerase multiplex

Abstract

RESUMO: Vaginose Bacteriana (VB) é um distúrbio muito comum caracterizado pela diminuição da microbiota lactobacilarpredominante e crescimento excessivo de bactérias anaeróbias comensais. Está associada a resultados adversos na saúde de mulheres grávidas e não grávidas. Até o momento, métodos convencionais limitados têm sido usados no diagnóstico de VB, dificultando o entendimento de sua fisiopatologia e epidemiologia. Neste estudo nós reportamos a validação do método reação em cadeia da polimerase multiplex (PCR-M) para detecção simultânea de treze agentes associados à vaginosebacteriana (BV-AAs) mais relacionados a quadros sintomático de VB: Gardnerellavaginalis, Mobiluncuscurtisii, Mobiluncusmulieris, Bacteroides fragilis, Mycoplasmahominis, Atopobiumvaginae, Ureaplasmaurealyticum, Megasphaeratipo I, BVAB1, BVAB2, VAB3, SneathiasanguinegenseMycoplasmagenitalium, em amostras cérvico-vaginais. Os parâmetros gerais de validação da PCR-M foram elevados, mostrando concordância de 99,08%, sensibilidade, especificidade e valor preditivo positivo de 100,0%, valor preditivo negativo de 97,0%, acurácia de 99,3%, e concordância de 100% com os critérios de Nugent. VB-AAs foram detectados em 162 amostras (72,6%), somente para um agente (46,9%) ou simultaneamente para dois ou mais (53,1%). O VB-AA mais frequentefoi G. vaginalis (n = 74), seguido por M. tipo I (n = 52), BVAB1 (n = 35), U. urealyticum (n = 28) e BVAB3 (n = 27 ). O ensaio de PCR-M mostrou grande potencial de impacto em diagnosticarVB e contribui para diminuiçãodas complicações associadas em um futuro próximo

ABSTRACT: Bacterial vaginosis (BV) is the most common vaginal disorder, characterized by depletion of the normal lactobacillus-dominant microbiota and overgrowth of commensal anaerobic bacteria. BV is associated with adverse health outcomes in both pregnant and non-pregnant women. To date, conventional methods are considerate limited to evaluate BV diagnostic, difficulting theunderstandment of their pathophysiology and epidemiology. Here we report the validation of a multiplex polymerase chain reaction (M-PCR) method to simultaneous screen thirteen Bacterial Vaginosis-associated agents (BV-AAs) most related to symptomatic BV:Gardnerellavaginalis, Mobiluncuscurtisii,Mobiluncusmulieris, Bacteroidesfragilis, Mycoplasma hominis, Atopobiumvaginae,Ureaplasmaurealyticum, Megasphaeratype I,BVAB1, BVAB2, BVAB3, Sneathiasanguinegensand Mycoplasma genitaliumin cervical-vaginal samples. The overall validation parameters of M-PCR were high with 99.08% agreement, sensitivity, 100.0%specificity and positive value, 97.0% negative predictive value, 99.3%accuracy, and 100%agreement with Nugent results.BV-AAs were detected in 162 samples (72.6%) as a single agent (46.9%) or simultaneously (53.1%). The most frequent of BV-AA was G. vaginalis (n= 74), followed by M. type I (n= 52), BVAB1 (n= 35), U. urealyticum(n= 28) and BVAB3 (n= 27).Thus, this M-PCR assay has great impact potential for BV diagnosis and contribute to diminish complications associated in the near future